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高效分離的秘密:凝膠滲透色譜儀核心組件探秘

更新時(shí)間:2025-04-22瀏覽:75次
  凝膠滲透色譜儀(GPC)是一種分離分析高分子化合物的儀器。其核心原理基于體積排除效應(yīng),色譜柱內(nèi)填充多孔凝膠顆粒,當(dāng)高分子溶液流經(jīng)時(shí),不同大小的分子因進(jìn)入凝膠孔隙程度不同而實(shí)現(xiàn)分離。大分子無(wú)法進(jìn)入孔隙,路徑短、流速快,先流出;小分子可進(jìn)入孔隙,路徑長(zhǎng)、流速慢,后流出。
  凝膠滲透色譜儀其核心組成部分包括以下模塊:
  1、輸液系統(tǒng)
  溶劑儲(chǔ)液罐
  儲(chǔ)存流動(dòng)相(如四氫呋喃、氯仿、DMF等),通常為耐腐蝕的玻璃或不銹鋼材質(zhì)。
  部分儀器配備脫氣裝置,避免流動(dòng)相中的氣泡影響檢測(cè)。
  高壓輸液泵
  提供穩(wěn)定、脈動(dòng)小的流速(如0.1~10 mL/min),確保分離重現(xiàn)性。
  類(lèi)型:往復(fù)式柱塞泵(恒流模式)或雙活塞泵(適用于高粘度溶劑)。
  在線脫氣模塊(可選)
  通過(guò)真空或超聲波去除流動(dòng)相中的氣體,防止柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡。
  2、進(jìn)樣系統(tǒng)
  自動(dòng)進(jìn)樣器
  精確控制進(jìn)樣量(如1~1000μL),支持多樣品連續(xù)分析。
  配備微量注射器或蠕動(dòng)泵,部分儀器可加熱進(jìn)樣以降低高沸點(diǎn)樣品的粘度。
  手動(dòng)進(jìn)樣口
  用于單次進(jìn)樣,需配合進(jìn)樣閥(如六通閥)或注射器直接注入。
  3、分離系統(tǒng)(色譜柱)
  凝膠填充柱
  填料類(lèi)型:多孔凝膠(如交聯(lián)聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物)或無(wú)機(jī)多孔材料(如硅膠、玻璃珠)。
  分離原理:小分子進(jìn)入凝膠孔徑,滯留時(shí)間長(zhǎng);大分子無(wú)法進(jìn)入孔徑,快速通過(guò)。
  柱組合:通常串聯(lián)多根不同孔徑的柱(如保護(hù)柱+分析柱),拓寬分子量分離范圍。
  柱溫控制
  加熱或冷卻色譜柱,維持恒定溫度(如30~50℃),減少分子擴(kuò)散和粘度變化對(duì)分離的影響。
  4、檢測(cè)系統(tǒng)
  通用型檢測(cè)器
  示差折光檢測(cè)器(RI):通過(guò)測(cè)量參比池與樣品池的折射率差異檢測(cè)樣品,適用于大多數(shù)聚合物和生物大分子。
  紫外檢測(cè)器(UV):檢測(cè)特定波長(zhǎng)(如254 nm)下的吸光度,適用于含芳香基團(tuán)或共軛結(jié)構(gòu)的樣品。
  蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD):用于檢測(cè)無(wú)紫外吸收或RI響應(yīng)低的樣品(如多糖、脂類(lèi))。
  多角度激光光散射檢測(cè)器(MALS)
  測(cè)量散射光強(qiáng)度與角度的關(guān)系,計(jì)算絕對(duì)分子量、半徑及構(gòu)象信息,常與RI/UV聯(lián)用。
  5、數(shù)據(jù)處理與分析系統(tǒng)
  數(shù)據(jù)采集器
  記錄檢測(cè)器信號(hào),生成色譜圖(如峰高、保留時(shí)間、峰面積)。
  部分儀器集成軟件,自動(dòng)計(jì)算分子量分布
  校準(zhǔn)與軟件
  標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn):使用已知分子量的窄分布標(biāo)準(zhǔn)品(如聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯)建立校準(zhǔn)曲線。
  軟件功能:譜圖疊加、基線校正、分子量分布擬合(如Log-Normal分布模型)。
  6、輔助組件
  柱溫箱
  精確控制色譜柱溫度(±0.1℃),減少溫度波動(dòng)對(duì)分離的影響。
  溶劑回收系統(tǒng)
  收集廢液并分離再生溶劑,降低運(yùn)行成本(可選配置)。
  預(yù)處理模塊
  在線過(guò)濾或固相萃?。⊿PE)裝置,去除樣品中的雜質(zhì)顆粒或鹽分。

凝膠滲透色譜儀

 

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